临床实验室常用血液抗凝剂的特点及应用

来源:佛山市中医院 发布时间:2014-04-09

  在实验室检验中有许多检测项目的血液标本是需要抗凝才可以检测的,而抗凝剂种类较多,实际应用中要根据不同的需要进行选择,才能获得理想的效果。目前我科常用的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)、枸橼酸盐、氟化钠等4种,现将它们的特点及应用分别叙述如下:

  一、肝素(绿色头试管)

  肝素是用于血液化学成分检测的首选抗凝剂,是一种含有硫酸基团的粘多糖,其抗凝机理主要是与抗凝血酶Ⅱ(AT-Ⅱ)一起,在低浓度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用,并能加强抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而阻止凝血酶的形成,还有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用,在高浓度时可阻断凝血酶与纤维蛋白的反应,并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。通常用肝素抗凝的剂量为10.0-12.5 IU/ml血液。肝素对血液成分干扰较少,不影响红细胞体积,不引起溶血,适用于做红细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压积及普通生化测定。但肝素具有抗凝血酶作用,不适合做凝血试验。此外,肝素抗凝血不能用于制作血涂片,因为Wright染色后出现深蓝色背景,影响显微镜计数。肝素抗凝血应于短时间内使用,否则放置过久血液又可凝固。 

  二、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)(紫色头试管)

  EDTA能与血液中Ca2+结合成螯合物,凝血过程被阻断,血液不能发生凝固。EDTA盐有钾、钠、锂盐,国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA-K2,其溶解度最高,抗凝速度最快。EDTA盐通常配成质量分数是15%的水溶液,每ml血液加1.2mgEDTA,即每5ml血液加0.04ml 15%EDTA溶液。EDTA盐可在100℃下干燥,抗凝作用不变。此抗凝剂不影响白细胞计数及大小,对红细胞形态影响最小,并且可以抑制血小板的聚集,适用于一般血液学检测。但如果抗凝剂浓度过高,渗透压上升,会造成细胞皱缩。EDTA溶液pH与盐类关系较大,低pH可使细胞膨胀。EDTA-K2可使红细胞体积轻度膨胀,采血后短时间内平均血小板体积非常不稳定半小时后趋于稳定。EDTA-K2使 Ca2+、Mg2+下降,同时使肌酸激酶、碱性磷酸酶活性降低,EDTA-K2的最佳浓度为1.5mg/ml血液,如果血少,中性粒细胞会肿胀分叶消失;血小板会肿胀、崩解,产生正常血小板的碎片,使分析结果产生错误。EDTA由于能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合,不适于凝血和血小板功能检测,也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。此外,EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子,故不适合制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。

  三、枸橼酸盐(蓝色头试管1:9、黑色头试管1:4)

  枸橼酸盐主要是枸橼酸钠,其抗凝原理是能与血液中的Ca2+结合形成螯合物使Ca2+失去凝血功能,凝血过程被阻断,从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有Na3C6H5O7·2H2O和2Na3C6H5O7.11H2O两种晶体,通常用前者配成3.8%或3.2%的水溶液,测定血沉用3.8%枸橼酸钠抗凝,抗凝剂与血液比例为1:4;凝血试验需用3.2%枸橼酸钠抗凝,比例为1:9。大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝,它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的稳定,并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小,可用于血小板功能分析。枸橼酸钠细胞毒性较小,也是输血中血液保养液的成分之一,但是枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血液,碱性强,不适用于血液化验和生化测验。

  四、氟化钠 (灰色头试管)

  氟化钠(NaF)中的氟离子可与Ca2+结合形成螯合物而发挥抗凝作用,但其抗凝能力较其他抗凝剂弱,氟离子可抑制糖酵解中的烯醇化酶,防止糖酵解,若未加氟化钠,血标本中的葡萄糖含量将以每小时6%的速度下降,而在有氟化钠存在的条件下,血糖浓度在25摄氏度的条件下可以稳定24h,4摄氏度可以稳定72h,临床上常用EDTA-K2和NaF一起作为抗凝剂用于血糖测定。

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